Петля фаза ноль протокол: Протокол измерения сопротивления петли «фаза-нуль». Бланк и образец 2021 года

Непрямые синтезаторы частоты — еще одно важное применение ФАПЧ. Два других ключевых приложения ФАПЧ:

• Распределение по времени. Для распределения точно синхронизированных тактовых импульсов в цифровых логических схемах (например, в микропроцессорных системах).
• Восстановление сигнала. Для обеспечения «чистого» сигнала и запоминания частоты в случае прерывания (например,г., при использовании импульсных передач).

При цифровой передаче данных используются схемы фазовой автоподстройки частоты чаще, чем при аналоговой передаче. Они также чаще производятся в виде интегральных схем, хотя для обработки микроволновых сигналов используются дискретные схемы.

Мерцание предсердий, обнаруженное при непрерывном мониторинге ЭКГ — полнотекстовый просмотр

Справочная информация:

Ишемический инсульт представляет собой растущую проблему для здоровья во всем мире (Heidenreich PA, et al. Circulation 2011; PMID 21262990).По крайней мере, 20% ишемических инсультов связаны с фибрилляцией предсердий (ФП) (Marini C, et al. Stroke J Cereb Circ 2005; PMID 15879330). Еще 30% являются так называемыми криптогенными, возможно, связанными с недиагностированной ФП (Brachmann J, et al. Circ Arrhythm Electrophysiol 2015; PMID 26763225). Приблизительно у 30% общей популяции пациентов с кардиостимуляторами или кардиовертерами-дефибрилляторами ранее неизвестная ФП будет обнаруживаться в течение первых 2-3 лет после имплантации (Healey JS, et al. N Engl J Med 2012; PMID 22236222; ASSERT).Хотя большинство этих эпизодов ФП непродолжительны и бессимптомны, исследование ASSERT показало, что такая ФП связана с риском инсульта. С тех пор, как это было опубликовано, скрининг на ФП привлек к себе повышенное внимание исследователей и представителей отрасли, хотя имеющиеся данные еще не подтверждают систематический массовый скрининг.

–

Цели:

Исследование LOOP определит, снизит ли длительный непрерывный скрининг и начало ОАК для эпизодов ФП длительностью ≥6 минут риск инсульта у пациентов с факторами риска инсульта.

–

Методы:

Пациенты из общей популяции получат письмо-приглашение от одного из четырех исследовательских центров, расположенных в 3 из 5 административных регионов Дании.

Соответствующие критериям участники исследования должны быть старше 70 лет и иметь ≥1 из следующих факторов риска инсульта; артериальная гипертензия, диабет, сердечная недостаточность или перенесенный инсульт, в то время как любая ФП в анамнезе или существующее сердечное имплантируемое электронное устройство являются критериями исключения.

Всего 6000 участников будут рандомизированы 3: 1 для контроля (n = 4500) или для получения имплантируемого петлевого регистратора с непрерывным удаленным мониторингом (n = 1500) и инициированием OAC при обнаружении AF.

Первичная конечная точка — время до первого инсульта или системной артериальной эмболии. Судебное разбирательство является событийным, и его планируется продолжить до тех пор, пока не произойдет 279 первичных событий, по которым было вынесено решение.

Под-исследования включают характеристику ФП, экономический анализ здоровья, оценку качества жизни, оценку когнитивных функций и изучение маркеров риска на ЭКГ в 12 отведениях, генетику, визуализацию сердца и мозга, биохимию и многое другое.

Комбинация TMS и tACS для замкнутой фазовой модуляции кортикоспинальной возбудимости: технико-экономическое обоснование сенсомоторная кора головного мозга отличается большой вариабельностью.Мгновенная фаза корковых колебаний во время стимуляции была предложена как возможный источник этой изменчивости. Чтобы исследовать эту гипотезу, импульсы TMS должны быть нацелены на определенную фазу с высокой временной точностью.

Цель : Целью данного технико-экономического обоснования было введение методологии, способной исследовать эффекты фазозависимой стимуляции путем одновременного применения стимуляции переменным током (tACS) и TMS.

Метод : мы применили онлайн-калибровку и TMS с обратной связью для определения четырех конкретных фаз (0 °, 90 °, 180 ° и 270 °) одновременного tACS с частотой 20 Гц над первичной моторной корой (M1) семи здоровых субъектов. .

Результат : Интегрированная система стимуляции была способна поражать целевую фазу с высокой точностью (SD ± 2,05 мс, т. Е. ± 14,45 °), вызывая фазозависимую модуляцию MEP с фазовой задержкой (CI95% = -40,37 ° до -99,61 °), который был стабильным для всех испытуемых ( p = 0,001).

Заключение : Комбинация различных методов нейромодуляции способствует высокоспецифичной стимуляции, зависящей от состояния мозга, и может представлять собой ценный инструмент для изучения физиологического и терапевтического эффекта фазозависимой стимуляции, например.г., в контексте нейрореабилитации.

Ключевые слова: Зависимая от состояния мозга, фазозависимая, адаптивная, целевая модуляция, бета-колебания

Введение

Транскраниальная магнитная стимуляция (ТМС) способна исследовать кортикоспинальную возбудимость, модулировать активность мозга и нарушать патологические паттерны (Hallett and Чокроверти, 2005; Зибнер, Циманн, 2007; Чен и др., 2008). Однако существует физиологическая вариабельность амплитуды моторно-вызванного потенциала (МВП) после идентичных импульсов TMS, которая, скорее всего, связана с состоянием мозга во время стимуляции (Kiers et al., 1993; Thickbroom et al., 1999; Дарлинг и др., 2006). Твердое понимание взаимодействия эффектов стимуляции с физиологией коры головного мозга имеет решающее значение для надежного применения этой технологии в терапевтических условиях. Поэтому ТМС была объединена с записями электроэнцефалографии (ЭЭГ) для изучения этого взаимодействия. Появляется все больше свидетельств того, что мощность предстимульного кортикального слоя (в основном в альфа- и бета-диапазоне) оказывает значительное влияние на MEP (Zarkowski et al., 2006; Лепаж и др., 2008; Саусенг и др., 2009; Мяки и Илмониеми, 2010 г .; Feurra et al., 2013; Takemi et al., 2013; Gharabaghi ​​et al., 2014; Краус и др., 2016а, б). Кроме того, в недавних исследованиях применялись различные методологии для изучения влияния предстимульной фазы корковых ритмов на MEP (Ferreri et al., 2011; Keil et al., 2013; Schulz et al., 2014; Berger et al., 2014; Kundu et al., 2014). Оценка фазовой зависимости затруднена необходимостью получения равномерно распределенных импульсов TMS по фазовому спектру, чтобы уменьшить любое смещение из-за неравномерного распределения дискретизированных фаз.Поэтому во многих исследованиях использовался временной джиттер между импульсами стимуляции (Ferreri et al., 2011; Keil et al., 2013; Schulz et al., 2014; Berger et al., 2014; Kundu et al., 2014) вместо фиксированного времени. -интервалы (van Elswijk et al., 2010). Однако для оценки этих данных использовались различные методы анализа, такие как Фурье (Mäki and Ilmoniemi, 2010; van Elswijk et al., 2010), Hilbert (Keil et al., 2013) или вейвлет-преобразование (Berger et al., 2014). применяется, что затрудняет прямое сравнение различных результатов.

Альтернативой анализу post hoc взаимодействия случайно применяемых стимулов и соответствующего состояния мозга является применение импульсов более контролируемым образом, например, запуск их на основе онлайн-обнаружения текущей фазы. Например, применяя адаптивную пороговую обработку сигнала мозга во временной области, стимулы были направлены в сторону пика и спада низкочастотных колебаний (0,16 и 2 Гц) во время сна (Bergmann et al., 2012). Zrenner et al.(2015a, b) недавно предложили использовать специализированное оборудование для записи и анализа в реальном времени для стимуляции с фазовой синхронизацией в альфа-диапазоне на основе прямой проекции метода преобразования Фурье с скользящим окном. Поскольку любое срабатывание триггера подвержено собственному запаздыванию по времени и основано на измерениях с шумом в динамической системе, фазозависимая стимуляция сталкивается с несколькими препятствиями. На основе характеристик измеренных данных сначала должна быть разработана модель прогнозирования основной мозговой активности (проблема предсказуемости).Во-вторых, скорость технической системы, в основном определяемая задержкой анализа сигнала и запуска, должна быть быстрее, чем динамика целевой функции (проблема в реальном времени). Наконец, синхронизация всей системы должна быть достаточно точной, чтобы успешно нацеливаться на желаемые функции, то есть фазовое дрожание должно быть низким (проблема точности). На фазозависимую стимуляцию также влияет проблема методологической гибкости (хотя и менее апостериорных подходов ) во время оценки фазового спектра.Хотя все методы преобразования, оценивающие мгновенную фазу, теоретически могут давать одинаковые результаты (Bruns, 2004), их гибкость в отношении точной реализации может вызвать проблемы логического вывода (Gelman and Loken, 2014).

Чтобы преодолеть вышеупомянутые проблемы, мы предлагаем комбинацию двух неинвазивных методов стимуляции мозга для изучения зависимости эффектов стимуляции от фазы корковых колебаний. В частности, мы использовали транскраниальную стимуляцию переменным током (tACS) для модуляции спонтанной колебательной активности, тем самым решая проблему предсказуемости и реального времени.Более того, чтобы обеспечить TMS на желаемой фазе tACS, была применена калибровка систематического запаздывания, тем самым решая проблему точности. Базовая концепция сочетания tACS с TMS уже применялась, например, для оценки изменений корковой возбудимости до пост-поста после повторяющихся стимулов (Goldsworthy et al., 2016). Он также использовался при очень низкой частоте tACS (0,8 Гц) с положительным смещением тока (Bergmann et al., 2009). Здесь мы расширяем это направление исследований, реализуя синхронную запись сигнала tACS и артефакта TMS для оценки и калибровки временной точности применяемых одиночных импульсов по отношению к колебаниям с более высокой частотой, чем когда-либо изучались ранее, т.е.е., в бета-диапазоне (20 Гц). Помимо проверки его методологической осуществимости, мы также стремились использовать временную точность этого подхода, изучая фазовую модуляцию кортикоспинальной возбудимости.

Материалы и методы

Субъекты

После получения письменного информированного согласия семь здоровых субъектов (средний возраст: 22 года, ЗППП: 3 года; 5 мужчин; все правши) приняли участие в этом методическом исследовании осуществимости, которое является частью более крупное текущее исследование. Ни один из субъектов не имел в анамнезе неврологических заболеваний или лекарств.Протокол исследования был одобрен местным этическим комитетом медицинского факультета Тюбингенского университета и проводился в соответствии с принципами Хельсинкской декларации.

Препарат

Запись биполярной электромиографии (ЭМГ) первой дорсальной межкостной мышцы (FDI) правой руки выполнялась при монтаже сухожилий живота с частотой дискретизации 5 кГц (BrainAmp ExG, Brain Products, Мюнхен, Германия). Мы определили расположение горячей точки FDI в первичной моторной коре (M1) как точку, которая вызывает самый высокий MEP с самой низкой интенсивностью TMS.ТМС проводилась с помощью интегрированной нейронавигационной системы (Nexstim, Хельсинки, Финляндия) с катушкой в ​​форме восьмерки, которая индуцировала задне-передний ток. После того, как горячая точка была определена, резиновый кольцевой электрод (внутренний диаметр 2,5 см, внешний диаметр 5 см) помещали над горячей точкой, а второй прямоугольный электрод (5 × 6 см) помещали над Pz. Оба электрода были присоединены к стимулятору постоянного / переменного тока (NeuroConn, Ильменау, Германия), и гель электролита использовался для поддержания импеданса ниже 10 кОм.Электроды удерживались на месте плотным колпачком для ЭЭГ, закрывающим кожу головы. Кроме того, часть тока сигнала tACS была направлена ​​через разделение тока (1 МОм против 1 кОм) и впоследствии записана с использованием биполярного усилителя с частотой дискретизации 5 кГц. Поскольку входное сопротивление усилителя составляло 10 ГОм, ток, потерянный при записи, был незначительным. Кроме того, мы добавили два пассивных Ag / Ag-Cl-электрода рядом с точкой доступа, то есть непосредственно под катушкой TMS, для обнаружения любых артефактов. Расположив электроды стимуляции, мы использовали нейронавигационную систему TMS, чтобы поддерживать положение и ориентацию катушки постоянными в определенной горячей точке во время последующего измерения и вмешательства.Мы оценили порог двигателя покоя (RMT) FDI, используя ступенчатую процедуру для обнаружения интенсивности TMS, вызывающей MEP выше 50 мкВ в 50% импульсов. Мы рассчитали шесть интенсивностей стимуляции (SI) на 90%, 100%, 110%, 120%, 130% и 140% относительно RMT для каждого субъекта. Схема показана на рисунке.

Показана экспериментальная установка. Стимулятор для стимуляции переменным током (tACS) (1) подключен к делителю тока (2), который перенаправляет часть сигнала tACS, направленного к субъекту (3), обратно в электроэнцефалографический (EEG) усилитель (4) для запись.Регистрирующий компьютер (5) также запускает систему транскраниальной магнитной стимуляции (ТМС) (6). Артефакт стимуляции регистрируется с помощью электрода ЭЭГ, расположенного на голове пациента. Сводя два артефакта стимуляции к контролю фазовой согласованности (PC), можно выполнить точную синхронизацию всей системы после тестового импульса. После этого импульсы TMS могут применяться в определенных фазах формы волны tACS.

Техническая процедура

Вмешательство проводилось в шесть прогонов, в каждом из которых TMS применялась в разных SI.Порядок SI каждого прогона был рандомизирован по субъектам. В настоящем методическом технико-экономическом обосновании мы сообщаем о результатах только 110% SI. Каждая пробежка длилась около 3 минут с 1-минутным перерывом между пробежками. Во время каждого прогона испытуемому доставлялось 200 с tACS (20 Гц, 1 мА, 1 с нарастание, 1 с замедление), ограничивая общую продолжительность стимуляции до 20 минут (Nitsche and Paulus, 2007 ). В более ранних исследованиях мы наблюдали, что tACS с частотой 20 Гц могут вызывать ощущения фосфена (Raco et al., 2014). Однако ни один из участников этого исследования не сообщил о нейросенсорных эффектах.

В начале каждого цикла мы использовали серию тестовых импульсов TMS для синхронизации фазы tACS и времени стимуляции TMS. После калибровки (см. Ниже) импульсы TMS запускались со специфической для цикла интенсивностью каждые 5 с (предварительно заданное дрожание ± 500 мс), при этом нацеливаясь на одну из четырех конкретных фаз tACS: пик, спадающий фронт, минимум и восходящий фронт (т. Е. 0 °, 90 °, 180 ° и 270 °) в произвольном порядке. Каждая из этих четырех фаз была выбрана случайным образом 10 раз в течение каждого цикла, в результате чего в общей сложности получалось 40 импульсов стимуляции за цикл.Для достижения необходимой точности мы синхронизировали два стимулятора, используя автоматическую калибровку с обратной связью, продолжающуюся примерно 1 с в начале каждого цикла. Эта процедура указана в приведенном ниже коде. Для этого расчета случайный импульс TMS на короткое время запускался в начале tACS, в то время как фаза, которая была достигнута этим первым тестовым импульсом TMS, анализировалась. Это позволило нам оценить временную / фазовую задержку системы стимуляции после псевдокода, который подробно иллюстрирует применяемый алгоритм. Кроме того, на рисунке показан пример сигнала, подаваемого в алгоритм.

На рисунке показаны примерные данные, используемые для алгоритма стимуляции, зависящей от фазы, и соответствующие переменные, участвующие в расчетах. Желтый сигнал представляет собой артефакт TMS тестового импульса, доставленного случайным образом в начале эпохи. Линия синуса показывает записанную необработанную форму волны tACS. Задержка между импульсом TMS и первой целевой фазой в данных (ошибка TMS) используется для расчета будущих временных окон для запуска TMS на конкретной фазе tACS.В показанном здесь примере ошибка TMS 23 мс добавляется к кратному времени цикла стимуляции (50 мс) для обнаружения пиков tACS (прогноз PEAK). При использовании этого метода задержки, связанные с потоковой передачей данных и запуском как TMS, так и tACS, неявно учитываются в расчетах и ​​не требуют отдельного рассмотрения.

Псевдокод для синхронизации оборудования

%% ТЕСТОВЫЙ ИМПУЛЬС И СИНХРОНИЗАЦИЯ ОБОРУДОВАНИЯ

Запуск tACS

Начало записи

Инициализация часов

Доставить тестовый импульс TMS n

Определить фазу

для

76 MS =76. : number_of_trials

Ожидание определенного интервала между испытаниями (плюс джиттер)

Определить текущую фазу tACS на основе часов

Выбрать целевую фазу из (переставленного) набора фаз

Рассчитать кратчайшее время ожидания, необходимое для достижения целевой фазы с помощью TMS

Дождитесь времени ожидания

Trigger_TMS_pulse

end

Предварительная обработка и анализ

Записанные данные EMG были разделены на эпохи с диапазоном времени ± 500 мс с центром в артефакте TMS.Данные были проверены визуально, и испытания, загрязненные артефактами, и, таким образом, препятствующие обнаружению MEP, были удалены (минимальное количество удаленных испытаний на одного субъекта: 1, среднее: 2,1, максимальное: 4, всего: 15, процент всех испытаний: 1,5%). Размах амплитуды MEP измеряли как диапазон кривой EMG от 10 до 50 мс после импульса TMS. У каждого субъекта амплитуды МВП были нормализованы относительно амплитуды МВП на 95-м процентиле всех измеренных МВП. Мы усреднили MEP по окнам, т.е.е., для первых трех и последних трех поездов.

Обратите внимание, что, хотя стимулы применялись в случайном порядке, их распределение по сигналу tACS было равномерным. Поскольку они переводятся в длину периода N, равную 4, мы впоследствии смогли применить дискретное преобразование Фурье к значениям MEP, чтобы оценить величину и фазовую задержку взаимодействия между фазой tACS и эффектом TMS. Комплексные значения также можно использовать для оценки согласованности фазовой задержки между субъектами аналогично тому, как это делается для согласованности между исследованиями (ITC).(п) |

(2)

PC привязан к диапазону от 0 (отсутствие согласованности) до 1 (полная согласованность) и геометрически может пониматься как длина среднего вектора. Эта длина представляет стабильность фазозависимой модуляции MEP у субъектов. Чтобы оценить статистическую значимость, мы 1000 раз переставили четыре значения MEP для каждого субъекта и повторили анализ. Мы считали, что MEP значительно модулируются фазой tACS, когда фактически измеренная фазовая согласованность превышает 95-й процентиль распределения с перестановкой.

Системная точность

Чтобы оценить точность системы, мы объединили испытания семи субъектов. Мы оценили фазу фактической стимуляции на основе преобразования Фурье за ​​500 мс до импульса TMS. Распределение иллюстрируется гистограммой (рисунок). Затем мы сместили фактическую фазу, измеренную на целевой фазе этого испытания (т.е. 0 °, 90 °, 180 ° и 270 °), и использовали набор инструментов CircStat (Berens, 2009) для оценки доверительных интервалов.

Показан полярный график фаз tACS, пораженных TMS у всех субъектов. Видны четкие пики при 0 °, 90 °, 180 ° и 270 °, что свидетельствует о точности метода.

Обсуждение

Фаза и временная точность

В настоящей работе мы описываем метод исследования фазовой зависимости TMS. Фазозависимые подходы требуют значительно более высокой временной точности, чем ТМС с обратной связью на основе мощности кортикальной полосы (Takemi et al., 2013; Gharabaghi ​​et al., 2014; Kraus et al., 2016b). Был использован ряд подходов, большинство из которых основано на post hoc оценке колебательной фазы (van Elswijk et al., 2010; Ferreri et al., 2011; Keil et al., 2013; Schulz et al. , 2014; Berger et al., 2014; Kundu et al., 2014). В меньшем количестве исследований использовалась стимуляция с обратной связью, путем онлайн-запуска стимуляции в желаемой фазе ЭЭГ (Bergmann et al., 2012; Zrenner et al., 2015b) или путем комбинирования tACS с TMS для контроля фазы на какая стимуляция должна иметь место (Bergmann et al., 2009; Goldsworthy et al., 2016). В более ранних подходах с использованием tACS-TMS точный метод достижения точной по фазе стимуляции остается неоднозначным. Более того, отчеты о достигнутой точности редки. В одном исследовании сообщается о джиттере в 1 мс при использовании специального оборудования реального времени (Zrenner et al., 2015a), что сравнимо с точностью 2 мс, достигаемой при использовании обычного клинического оборудования в нашем подходе.

Совершенная временная точность, очевидно, может быть достигнута только в том случае, если все компоненты работают в полностью детерминированной среде.Однако часто это не так, и лаборатории не имеют полного контроля или знаний о точности устройств стимуляции и записи. Без калибровки фактическое время всей системы зависит от поведения недетерминированных компонентов, что в худшем случае может вызвать систематическую ошибку. Кроме того, если необходима медицинская сертификация устройств, желаемый контроль над сертифицированными компонентами или покупка специального и дорогостоящего записывающего оборудования в реальном времени может оказаться невозможным.Представленный здесь подход к управлению направлен на точность, предсказуемость и скорость замкнутой системы тремя способами: во-первых, путем калибровки установки с помощью тестового импульса, во-вторых, путем сдвига стимуляции во времени, когда фазовая задержка слишком велика. и, в-третьих, путем проверки системы с использованием синхронного измерения сигнала tACS и артефакта импульса TMS. Вся система может быть легко реализована, даже если используются разные аппаратные компоненты. Калибровка считается особенно выгодной, поскольку она допускает изменчивость задержки связи, например.g., когда используются разные записывающие ПК, оборудование TCS или TMS. Кроме того, смещая стимуляцию на фиксированную фазовую задержку (2 * π), импульс может запускаться в еще более гибкой среде реального времени, например, когда желаемая фаза не может быть достигнута из-за внутренней задержки системы. Наконец, синхронная запись позволяет нам проверять отдельные испытания и взвешивать или отбрасывать их в соответствии с достигнутой точностью.

Фазозависимая модуляция

Примечательно, что при применении с tACS 20 Гц этот подход привел к физиологически правдоподобным результатам в отношении кортикоспинальной возбудимости.Исследования, основанные на случайной стимуляции, обнаружили значительные различия в бета-фазе перед стимулом между высокими и низкими MEP в затылочных, но не в сенсомоторных областях (Mäki and Ilmoniemi, 2010). В других исследованиях сообщается о значительной углово-линейной корреляции между фазой и амплитудой МВП только в сенсомоторной области (Keil et al., 2013). Было показано, что фаза бета-колебаний является решающей для кортикальных и кортикоспинальных вычислений, а также связана с возбудимостью кортикоспинальной системы (Miller et al., 2012; Ауманн и Прут, 2015; Romei et al., 2016). Кроме того, tACS 20 Гц влияет на ускорение движения (Погосян и др., 2009) и, в отличие от других частот, увеличивает кортикоспинальную возбудимость в покое (Feurra et al., 2013).

Физиологический анализ в этом исследовании был предварительным и предварительным. Однако результаты показывают, что фазовая модуляция происходит с совокупной продолжительностью tACS. В частности, мы не обнаружили никаких доказательств модуляции в течение нескольких первых импульсов TMS, но заметили значительную модуляцию в течение нескольких последних импульсов с отчетливым фазовым сдвигом примерно на -90 °.Обратите внимание, что ток через конденсатор опережает напряжение на 90 ° (Horowitz and Hill, 1989), что позволяет предположить, что мгновенный ток, а не напряжение, управляет корковой возбудимостью во время tACS.

Конечно, размер исследовательской выборки, использованной в этом методологическом исследовании осуществимости, и отсутствие прямых кортикальных записей не позволяют нам сделать слишком много далеко идущих выводов из этих результатов. Тем не менее, настоящие результаты подтверждают осуществимость предложенного подхода, демонстрируя возможность применения фазозависимой стимуляции с высокой точностью.

Перспективы

Возможно, что скалярное произведение для преобразования Фурье может быть вычислено, взяв фактические фазы, а не равномерно распределенные целевые фазы. В зависимости от уровня шума и его точного распределения в оценке это может снизить или повысить точность последующей оценки фазовой согласованности и запаздывания соответственно. Учитывая, что система уже достигла хорошей точности в отношении целевых фаз, в настоящее время мы предлагаем использовать стандартные подходы к преобразованию Фурье.

В настоящее время мы проводим более крупное исследование, в котором изучается взаимодействие между фазой и интенсивностью ТМС. С помощью этого подхода можно изучить многие альтернативные исследовательские вопросы. Например, можно исследовать разные фазовые задержки для разных частот, чтобы лучше понять реакцию транскраниального прохода; или для того, чтобы установить, есть ли фазовое выравнивание или фазовый дрейф с течением времени, тем самым предполагая взаимодействия с собственными частотами.

Обеспечение без касания | Руководство по установке и обновлению программного обеспечения Junos® OS

Zero Touch Provisioning устанавливает или обновляет программное обеспечение автоматически на ваших новых устройствах Juniper Networks с минимальное ручное вмешательство.

Таблица истории выпусков

21.3R1-EVO

Запуск в Junos OS Evolved Release 21.3R1, на PTX10001-36MR, PTX10003, Устройства PTX10004, PTX10008 и PTX10016, ZTP теперь поддерживает параметры DHCP 61 и 77. DHCP опция 61 используется для указания серийного номера шасси, а опция 77 DHCP используется для укажите марку, модель и версию программного обеспечения шасси.

21.2R1-EVO

Запуск в Junos OS Evolved Release 21.2R1 на устройствах PTX10008, Zero Touch Provisioning (ZTP) динамически определяет скорость порта WAN-интерфейсов и использует это информация для создания портов ZTP-сервера с одинаковой скоростью.

21.2R1-EVO

Начиная с Junos OS Evolved Release 21.2R1, устройства QFX5700 поддерживают возможность для интерфейсов WAN или интерфейсов управления автоматически загружать и установите соответствующее программное обеспечение и файл конфигурации на ваше устройство во время ZTP процесс начальной загрузки.

21.2R1

Запуск в ОС Junos Release 21.2R1 на устройствах QFX10002, Zero Touch Provisioning (ZTP) динамически определяет скорость порта WAN-интерфейсов и использует это информация для создания портов ZTP-сервера с одинаковой скоростью.

21.2R1

Запуск в ОС Junos версии 21.2R1, на EX2300-C, EX2300-MP, EX4300, EX4300-MP, EX4300-VC, EX4400-24MP, EX4400-48MP, EX4600-VC, EX4650 и EX4650-48Y-VC устройств, во время процесса начальной загрузки клиент phone-home может получить доступ к перенаправлению сервер через прокси-сервер.DHCP-сервер использует подопцию 8 DHCP-опции 43 для доставки сведения о прокси-серверах IPv4 и / или IPv6 для домашнего клиента. Демон DHCP запущенный на целевом коммутаторе узнает о прокси-серверах в начальном цикле DHCP и затем заполняет либо phc_vendor_specific_info.xml, либо phc_v6_vendor-specific_info.xml файлы, расположенные в каталоге / var / etc / с информация от производителя.

21.2R1

Начиная с версии 21 ОС Junos.2R1, на EX2300-C, EX2300-MP, EX4300, EX4300-MP, EX4300-VC, EX4400-24MP, EX4400-48MP, EX4600-VC, EX4650 и EX4650-48Y-VC устройств, вы можете использовать клиент DHCPv6 и ZTP для подготовки коммутатора. Во время начальной загрузки процесса, устройство сначала использует клиент DHCPv4 для запроса информации о образ и файл конфигурации с DHCP-сервера. Устройство проверяет привязки DHCPv4 последовательно. Если есть сбой с одной из привязок DHCPv4, устройство продолжает для проверки привязок до успешного завершения подготовки.Однако, если нет DHCPv4 bindings, устройство проверяет привязки DHCPv6 и следует тому же процессу, что и для DHCPv4. пока устройство не будет успешно инициализировано. Включены клиенты DHCPv4 и DHCPv6. как часть конфигурации устройства по умолчанию. DHCP-сервер использует параметры DHCPv6 59 и 17 и применимые подопции для обмена информацией, связанной с ZTP, между собой и клиент DHCP.

21.1R1

Запуск в ОС Junos Выпуск 21.1R1, на EX2300, EX2300-VC, EX3400, EX3400-VC, EX4400-24T, EX4400-48F, Устройств EX4400-48T и EX4600, когда домашний телефонный клиент получает информацию о прокси-сервер HTTP через параметр 43 DHCP, подопция 8, он создаст прозрачный протокол HTTPS туннель с прокси-сервером. Как только туннель установлен, домашний телефонный клиент использует туннель в качестве прокси для домашнего телефона или сервера перенаправления. Клиент для домашнего телефона загружает образ программного обеспечения и файл конфигурации через туннель на устройство.После завершения начальной загрузки устройство перезагружается и туннель закрывается.

21.1R1

Запуск в ОС Junos Выпуск 21.1R1, на EX2300, EX2300-VC, EX3400, EX3400-VC, EX4400-24T, EX4400-48F, Устройства EX4400-48T и EX4600, во время процесса начальной загрузки клиент phone-home может получить доступ к серверу перенаправления через прокси-сервер. DHCP-сервер использует DHCP-опцию 43. подопция 8 для доставки информации о прокси-серверах IPv4 и / или IPv6 на домашний телефон клиент.Демон DHCP, запущенный на целевом коммутаторе, узнает о прокси-серверах в начальный цикл DHCP, а затем заполняет либо phc_vendor_specific_info.xml, либо phc_v6_vendor-specific_info.xml файлы, расположенные в каталоге / var / etc / с информация от производителя.

20.4R1-EVO

Запуск в ОС Junos Evolved Release 20.4R1, поддержка устройств PTX10004 автоматизация настройки устройства и обновления программного обеспечения через интерфейс управления модуля маршрутизации 0 (RE0).

20.4R1-EVO

Запуск в Junos OS Evolved Release 20.4R1, ACX5448 и QFX5120-48YM устройства поддерживают возможность подключения к WAN-интерфейсам или интерфейсам управления. автоматически загрузите и установите соответствующее программное обеспечение и файл конфигурации на ваше устройство во время процесса начальной загрузки ZTP.

20.4R1

Запуск в ОС Junos версии 20.4R1 на серии MX, EX3400, EX4300, Устройства QFX5100 и QFX5200, ZTP поддерживает клиента DHCPv6.Во время начальной загрузки процесса, устройство сначала использует клиент DHCPv4 для запроса информации, касающейся образ и файл конфигурации с DHCP-сервера. Устройство проверяет привязки DHCPv4 последовательно. В случае сбоя одной из привязок DHCPv4 устройство будет продолжайте проверять привязки, пока подготовка не будет успешной. Если нет DHCPv4 привязки, однако устройство проверит привязки DHCPv6 и выполнит тот же процесс. что касается DHCPv4, пока устройство не будет успешно инициализировано.DHCP-сервер использует Опции 59 и 17 DHCPv6 и соответствующие подпараметры для обмена информацией, связанной с ZTP между собой и DHCP-клиентом.

20.4R1

Запуск в ОС Junos версии 20.4R1 на EX4600, EX4650, EX9200 с Устройства RE-S-EX9200-2X00X6, QFX5110, QFX5200, QFX5210, QFX5120-32C и QFX5120-48Y, вы для программное обеспечение для коммутатора.Когда коммутатор загружается, если есть параметры DHCP которые были получены от DHCP-сервера для ZTP, ZTP возобновляет работу. Если параметры DHCP не указаны присутствует попытка PHC. PHC позволяет коммутатору безопасно получать данные начальной загрузки, таких как конфигурация или образ программного обеспечения, без какого-либо вмешательства пользователя, кроме необходимости физически подключить коммутатор к сети. При первой загрузке коммутатора PHC подключается на сервер перенаправления, который перенаправляет на домашний сервер телефона для получения конфигурации или образ программного обеспечения.

20.2R1-S1

Запуск в ОС Junos версии 20.2R1-S1 на серии MX, EX3400, EX4300, Устройства QFX5100 и QFX5200, ZTP поддерживает клиента DHCPv6. Во время начальной загрузки процесса, устройство сначала использует клиент DHCPv4 для запроса информации, касающейся образ и файл конфигурации с DHCP-сервера. Устройство проверяет привязки DHCPv4 последовательно. В случае сбоя одной из привязок DHCPv4 устройство будет продолжайте проверять привязки, пока подготовка не будет успешной.Если нет DHCPv4 привязки, однако устройство проверит привязки DHCPv6 и выполнит тот же процесс. что касается DHCPv4, пока устройство не будет успешно инициализировано. DHCP-сервер использует Опции 59 и 17 DHCPv6 и соответствующие подпараметры для обмена информацией, связанной с ZTP между собой и DHCP-клиентом.

20.2R1

Запуск в ОС Junos версии 20.2R1 на SRX300, SRX320, SRX340, SRX345, SRX550 HM и SRX1500, вы можете использовать Zero Touch Provisioning с опциями DHCP или клиент домашнего телефона, чтобы подготовить ваше устройство.

20.1R1-EVO

Запуск в Junos OS Evolved Release 20.1R1 на устройствах PTX10003, Zero Touch Provisioning (ZTP) динамически определяет скорость порта WAN-интерфейсов и использует это информация для создания портов ZTP-сервера с одинаковой скоростью.

20.1R1-EVO

Запуск в ОС Junos Evolved Release 20.1R1, поддержка устройств PTX10008 автоматизация настройки устройства и обновления программного обеспечения через интерфейс управления модуля маршрутизации 0 (RE0).

19.4R1

Начиная с Junos OS Release 19.4R1, ZTP может автоматизировать подготовку конфигурация устройства и образ программного обеспечения на Juniper Route Reflector (JRR). ZTP поддерживает самостоятельное обновление образа и автоматическое обновление конфигурации с использованием параметров ZTP DHCP. В этом выпуска, ZTP поддерживает порты доходов от em2 до em9, в дополнение к порту управления em0, который поддерживается в версиях ОС Junos до 19.4R1.

19.3R1-Evo

Запуск в Junos OS Evolved Release 19.3R1, на устройстве QFX5220-128C, в режиме Zero Touch Provisioning (ZTP) можно использовать либо интерфейсы WAN, либо интерфейсы управления, для автоматической загрузки и установки соответствующего программного обеспечения и файл конфигурации на вашем устройстве во время процесса начальной загрузки.

19.3R1

Начиная с Junos OS Release 19.3R1, вы можете использовать либо интерфейсы WAN, либо интерфейсы управления, чтобы автоматически загружать и устанавливать соответствующее программное обеспечение и файл конфигурации на вашем маршрутизаторе во время процесса начальной загрузки ZTP.

19.2R1

Начиная с Junos OS Release 19.2R1, ZTP может автоматизировать подготовку конфигурация устройства и образ программного обеспечения на интерфейсе управления Emo для ACX5448 переключатели.

19.1-Evo

Начиная с Junos OS Evolved Release 19.1R1, ZTP может автоматизировать предоставление конфигурации устройства и образа программного обеспечения в интерфейсе управления для устройств QFX5220 и PTX10003.

19.1-Evo

Запуск в Junos OS Evolved Release 19.1R1, для мониторинга инициализации без касания на Junos OS Evolved используйте команду show system ztp.

18.3R1

Запуск в ОС Junos версии 18.3R1, ZTP, который автоматизирует подготовку конфигурации устройства и образа программного обеспечения с минимальным ручным вмешательством. поддерживается на хостах виртуальных машин серии MX.

18.2R1

Начиная с Junos OS Release 18.2R1, ZTP может автоматизировать подготовку конфигурация устройства и образ программного обеспечения на хост-платформах виртуальных машин, использующих PTX5000, Маршрутизаторы PTX3000, PTX10008, PTX10016, PTX10002-60C.

18.2R1

Начиная с Junos OS Release 18.2R1, ZTP может автоматизировать подготовку конфигурация устройства и образ программного обеспечения на хост-платформах виртуальных машин, которые используют QFX10008 и Коммутаторы QFX10016.

18.1R1

Начиная с Junos OS Release 18.1R1, ZTP может автоматизировать подготовку конфигурация устройства и образ программного обеспечения на хост-платформах виртуальных машин, которые используют QFX10002-60C переключатели.

17.2R1

Начиная с версии 17 ОС Junos.2R1, ZTP может автоматизировать предоставление конфигурация устройства и образ программного обеспечения на хост-платформах виртуальных машин, использующих PTX1000. маршрутизаторы.

16.1R1

Начиная с версии ОС Junos 16.1R1, вы можете инициализировать поддерживаемые устройства с помощью используя запускаемый сценарий или загружаемый файл конфигурации

12.2

Начиная с Junos OS Release 12.2, вы можете использовать консольные и операционные команды для мониторинга Zero Touch Provisioning.

Понимание графиков Боде | Rohde & Schwarz

Измерение устойчивости замкнутого цикла с помощью графиков Боде

Чтобы лучше описать применение графиков Боде, стабильность замкнутого контура источника питания постоянного / постоянного тока измеряется путем определения отклика замкнутого контура.Это можно проверить с помощью метода инжекции напряжения. Этот метод добавляет в цепь обратной связи очень маленький резистор — обычно порядка 10 Ом. Точку следует выбирать так, чтобы полное сопротивление в направлении петли обратной связи было намного больше, чем полное сопротивление в обратном направлении. Затем через резистор подается небольшой сигнал помехи. Обычно это делается с помощью так называемого инжекционного трансформатора, чтобы избежать влияния на контур. Затем измеряется отклик и строятся графики Боде.

Приборы для измерения отклика замкнутого контура

При измерении отклика с обратной связью можно использовать две разные категории инструментов. Первый из них — векторный анализатор цепей или ВАЦ. ВАЦ обычно имеет очень высокий динамический диапазон, что позволяет проводить очень точные измерения импеданса. Одним из недостатков использования векторного анализатора цепей, помимо стоимости и сложности, является то, что он лучше всего подходит для определения характеристик компонентов с сопротивлением 50 Ом. С другой стороны, осциллографы уже широко используются при разработке источников питания и позволяют напрямую определять характеристики шума и пульсаций на выходе.Осциллографы теперь также могут выполнять измерения стабильности, такие как коэффициент усиления и запаса по фазе, коэффициент отклонения источника питания и переходная характеристика.

Конфигурация теста: как измерить отклик контура управления с помощью осциллографа

Для измерения отклика контура источника питания постоянного и постоянного тока в контур должен быть введен сигнал помехи. Таким образом, следует выбрать точку, в которой полное сопротивление в направлении петли намного больше, чем сопротивление в обратном направлении.В точке инжекции помещается небольшой резистор, и напряжение возмущения подается параллельно инжекционному резистору с использованием широкополосного инжекционного трансформатора. Сигнал возмущения создается внутренним генератором осциллографа. Два канала осциллографа подключены по обе стороны от точки инжекции. На основе измеренных значений осциллограф создает и отображает графики Боде.

При измерении отклика в замкнутом контуре важно использовать подходящие датчики.Пиковая амплитуда в точках измерения может быть очень низкой на некоторых тестовых частотах. По этой причине рекомендуется использовать пассивные пробники 1x вместо более распространенных пробников 10x. Если отношение сигнала к шуму увеличивается, это также улучшает динамический диапазон измерений частотной характеристики. Также важно использовать заземляющую пружину или очень короткий заземляющий провод, чтобы уменьшить наводку шума переключения и индуктивные контуры заземления.

% PDF-1.5 % 1 0 объект > / Метаданные 1361 0 R / Страницы 2 0 R / StructTreeRoot 205 0 R / Тип / Каталог >> эндобдж 1361 0 объект > поток конечный поток эндобдж 2 0 obj > эндобдж 205 0 объект > эндобдж 207 0 объект > эндобдж 206 0 объект > эндобдж 210 0 объект [209 0 R 213 0 R 215 0 R 216 0 R 217 0 R 219 0 R 220 0 R] эндобдж 223 0 объект [222 0 R 225 0 R 226 0 R 227 0 R 229 0 R 233 0 R 239 0 R 244 0 R 249 0 R 251 0 R 257 0 R 262 0 R 267 0 R 272 0 R 277 0 R 279 0 R 285 0 290 р. 295 0 р. 300 0 р. 305 0 р. 310 0 р. 315 0 р. 320 0 р. 325 0 р.] эндобдж 237 0 объект > эндобдж 242 0 объект > эндобдж 247 0 объект > эндобдж 255 0 объект > эндобдж 260 0 объект > эндобдж 265 0 объект > эндобдж 270 0 объект > эндобдж 275 0 объект > эндобдж 283 0 объект > эндобдж 288 0 объект > эндобдж 293 0 объект > эндобдж 298 0 объект > эндобдж 303 0 объект > эндобдж 308 0 объект > эндобдж 313 0 объект > эндобдж 318 0 объект > эндобдж 323 0 объект > эндобдж 328 0 объект [327 0 R 330 0 R 332 0 R 334 0 R 335 0 R 336 0 R 337 0 R 338 0 R 339 0 R] эндобдж 342 0 объект [341 0 R 344 0 R 345 0 R 347 0 R 349 ​​0 R 350 0 R 351 0 R 352 0 R 353 0 R 354 0 R 355 0 R 356 0 R 357 0 R 358 0 R 359 0 R 360 0 R 361 0 R 362 0 R 364 0 R 365 0 R 367 0 R 368 0 R 370 0 R 371 0 R 373 0 R 374 0 R 376 0 R 377 0 R] эндобдж 380 0 объект [379 0 R 382 0 R 384 0 R 386 0 R 387 0 R 388 0 R 389 0 R 390 0 R 392 0 R 393 0 R 394 0 R 396 0 R 397 0 R] эндобдж 400 0 объект [399 0 R 402 0 R 403 0 R 405 0 R 407 0 R 408 0 R 409 0 R 410 0 R 411 0 R 413 0 R 414 0 R 415 0 R 416 0 R 417 0 R 418 0 R 419 0 R 420 0 R 421 0 R 423 0 R 424 0 R 426 0 R 427 0 R 429 0 R 430 0 R 431 0 R 432 0 R 434 0 R 435 0 R 436 0 R 437 0 R 438 0 R 439 0 R 441 0 R 442 0 R] эндобдж 445 0 объект [444 0 R 447 0 R 449 0 R 451 0 R 452 0 R 453 0 R 454 0 R 456 0 R 462 0 R 464 0 R 466 0 R 467 0 R 469 0 R 475 0 R 477 0 R 479 0 R 481 0 R 482 0 R] эндобдж 485 0 объект [484 0 R 487 0 R 489 0 R 491 0 R 492 0 R 493 0 R 494 0 R 495 0 R 496 0 R 497 0 R 498 0 R 499 0 R 500 0 R 501 0 R 502 0 R 503 0 R 504 0 R 505 0 R 506 0 R 507 0 R 508 0 R 509 0 R 510 0 R 511 0 R 512 0 R 513 0 R 514 0 R 515 0 R 516 0 R 517 0 R 518 0 R 519 0 R 520 0 R 521 0 R 522 0 R 523 0 R 524 0 R 525 0 R 526 0 R 527 0 R 528 0 R 529 0 R 530 0 R 531 0 R 532 0 R 533 0 R 534 0 R 535 0 R 536 0 R 537 0 538 р. 539 0 р. 540 0 р. 541 0 р. 542 0 р. 544 0 р. 546 0 р. 547 0 р. 549 0 р. 550 0 р. 551 0 р. 552 0 р. 553 0 прав. 0 R 560 0 R] эндобдж 563 0 объект [562 0 R 565 0 R 567 0 R 569 0 R 570 0 R 571 0 R 572 0 R 573 0 R 575 0 R 577 0 R 578 0 R 579 0 R 580 0 R] эндобдж 583 0 объект [582 0 R 585 0 R 587 0 R 589 0 R 590 0 R 591 0 R 592 0 R 593 0 R 595 0 R 596 0 R 597 0 R] эндобдж 600 0 объект [599 0 R 602 0 R 604 0 R 606 0 R 607 0 R 608 0 R 609 0 R 610 0 R 612 0 R 613 0 R 615 0 R 616 0 R] эндобдж 619 0 объект [618 0 R 621 0 R 623 0 R 625 0 R 626 0 R 627 0 R 628 0 R 629 0 R 631 0 R 635 0 R 637 0 R 639 0 R 640 0 R 642 0 R 646 0 R 648 0 R 650 0 652 руб. 0 654 руб. 0 655 руб.] эндобдж 658 0 объект [657 0 R 660 0 R 662 0 R 663 0 R 664 0 R 665 0 R 666 0 R 668 0 R 669 0 R 670 0 R 672 0 R 673 0 R 674 0 R 675 0 R] эндобдж 678 0 объект [677 0 R 680 0 R 682 0 R 684 0 R 685 0 R 686 0 R 687 0 R 688 0 R 689 0 R 691 0 R 692 0 R 693 0 R 694 0 R 695 0 R] эндобдж 698 0 объект [697 0 R 700 0 R 702 0 R 704 0 R 704 0 R 704 0 R 704 0 R 704 0 R 704 0 R 704 0 R 704 0 R 705 0 R 706 0 R 707 0 R 709 0 R 710 0 R 710 0 R 710 0 R 710 0 R 710 0 R 710 0 R 710 0 R 710 0 R 715 0 R 716 0 R 721 0 R 722 0 R 727 0 R 729 0 R 731 0 R 734 0 R 736 0 R 737 0 R 739 0 R 743 0 R 747 0 R 750 0 R 750 0 R 753 0 R 753 0 R 757 0 R 760 0 R 763 0 R 767 0 R 770 0 R 773 0 R 777 0 R 780 0 R 783 0 R 784 0 786 0 R 787 0 R 788 0 R] эндобдж 732 0 объект > эндобдж 791 0 объект [790 0 R 793 0 R 795 0 R 797 0 R 801 0 R 804 0 R 808 0 R 814 0 R 816 0 R 818 0 R 824 0 R 826 0 R 828 0 R 832 0 R 837 0 R 839 0 R 844 0 846 руб. 0 847 руб. 0 848 руб.] эндобдж 851 0 объект [850 0 R 853 0 R 855 0 R 857 0 R 858 0 R 859 0 R 860 0 R 861 0 R 862 0 R 863 0 R 865 0 R 866 0 R 867 0 R 868 0 R 869 0 R 870 0 R 872 0 R] эндобдж 875 0 объект [874 0 R 877 0 R 879 0 R 881 0 R 882 0 R 883 0 R 884 0 R 885 0 R 886 0 R 887 0 R 888 0 R 889 0 R 891 0 R 892 0 R 894 0 R 895 0 R 897 0 898 рандов 0 900 рандов 0 901 рандов 0 903 рандов 0 905 рандов 0 прав] эндобдж 908 0 объект [907 0 R 910 0 R 912 0 R 914 0 R 916 0 R 917 0 R 918 0 R 920 0 R 921 0 R 922 0 R 923 0 R 925 0 R 926 0 R 927 0 R 928 0 R 930 0 R 931 0 933 рэндов 0 934 рэндов 0 р] эндобдж 937 0 объект [936 0 R 939 0 R 941 0 R 943 0 R 944 0 R 945 0 R 946 0 R 947 0 R 949 0 R 950 0 R 951 0 R 952 0 R 953 0 R 955 0 R 956 0 R 958 0 R 959 0 R] эндобдж 962 0 объект [961 0 R 964 0 R 966 0 R 968 0 R 970 0 R 971 0 R 972 0 R 973 0 R 974 0 R 975 0 R 976 0 R 977 0 R 979 0 R 980 0 R] эндобдж 983 0 объект [982 0 R 985 0 R 987 0 R 989 0 R 990 0 R 991 0 R 992 0 R 994 0 R 995 0 R 996 0 R 997 0 R 998 0 R 999 0 R 1000 0 R 1001 0 R 1002 0 R 1003 0 R 1004 0 R 1005 0 R 1006 0 R 1008 0 R 1009 0 R 1011 0 R 1012 0 R 1014 0 R 1015 0 R 1017 0 R 1018 0 R 1020 0 R 1021 0 R] эндобдж 1024 0 объект [1023 0 R 1026 0 R 1028 0 R 1030 0 R 1031 0 R 1034 0 R 1036 0 R 1038 0 R 1039 0 R 1041 0 R 1042 0 R 1043 0 R 1044 0 R 1045 0 R 1046 0 R 1047 0 R 1048 0 R 1049 0 R 1050 0 R 1051 0 R 1052 0 R 1053 0 R 1055 0 R 1056 0 R 1058 0 R 1059 0 R 1061 0 R 1062 0 R 1064 0 R 1065 0 R 1067 0 R 1068 0 R] эндобдж 1071 0 объект [1070 0 R 1073 0 R 1075 0 R 1076 0 R 1077 0 R 1078 0 R 1079 0 R 1080 0 R 1081 0 R 1082 0 R 1083 0 R 1084 0 R 1085 0 R 1086 0 R 1087 0 R 1089 0 R 1090 0 R 1092 0 R 1093 0 R 1095 0 R 1096 0 R 1098 0 R 1099 0 R 1101 0 R 1102 0 R 1104 0 R 1105 0 R 1106 0 R 1107 0 R 1109 0 R 1111 0 R 1115 0 R 1118 0 R 1122 0 R 1125 0 R 1129 0 R 1132 0 R 1133 0 R] эндобдж 1136 0 объект [1135 0 R 1138 0 R 1140 0 R 1142 0 R 1143 0 R 1144 0 R 1148 0 R 1150 0 R 1152 0 R 1154 0 R 1156 0 R 1158 0 R 1160 0 R 1162 0 R 1163 0 R 1164 0 R 1166 0 1170 рандов 0 1172 рандов 0 1174 рандов] эндобдж 1177 0 объект [1176 0 R 1179 0 R 1181 0 R 1183 0 R 1184 0 R 1185 0 R 1186 0 R 1187 0 R 1188 0 R 1189 0 R 1190 0 R] эндобдж 1193 0 объект [1192 0 R 1195 0 R 1197 0 R 1198 0 R 1199 0 R 1202 0 R 1207 0 R 1208 0 R 1211 0 R 1216 0 R 1217 0 R 1219 0 R 1220 0 R 1223 0 R 1228 0 R 1232 0 R 1235 0 R 1240 0 R 1242 0 R 1243 0 R 1244 0 R 1245 0 R] эндобдж 1200 0 объект > эндобдж 1205 0 объект > эндобдж 1209 0 объект > эндобдж 1214 0 объект > эндобдж 1221 0 объект > эндобдж 1226 0 объект > эндобдж 1230 0 объект > эндобдж 1233 0 объект > эндобдж 1238 0 объект > эндобдж 1248 0 объект [1247 0 R 1250 0 R 1252 0 R 1253 0 R 1254 0 R 1260 0 R] эндобдж 1256 0 объект > эндобдж 1258 0 объект > эндобдж 1263 0 объект [1262 0 R 1265 0 R 1267 0 R 1274 0 R 1275 0 R 1280 0 R 1281 0 R 1286 0 R 1287 0 R 1288 0 R] эндобдж 1272 0 объект > эндобдж 1278 0 объект > эндобдж 1284 0 объект > эндобдж 1291 0 объект [1290 0 R 1293 0 R 1295 0 R 1300 0 R 1303 0 R 1304 0 R 1307 0 R 1310 0 R 1311 0 R 1314 0 R 1317 0 R 1318 0 R 1321 0 R 1324 0 R 1325 0 R 1326 0 R] эндобдж 1301 0 объект > эндобдж 1308 0 объект > эндобдж 1315 0 объект > эндобдж 1322 0 объект > эндобдж 1329 0 объект [1328 0 R 1331 0 R 1333 0 R 1334 0 R 1336 0 R 1337 0 R 1338 0 R] эндобдж 1328 0 объект > эндобдж 1331 0 объект > эндобдж 1333 0 объект > эндобдж 1334 0 объект > эндобдж 1336 0 объект > эндобдж 1337 0 объект > эндобдж 1338 0 объект > эндобдж 1327 0 объект > эндобдж 201 0 объект > / MediaBox [0 0 540 720] / Родитель 2 0 R / Ресурсы> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] / XObject >>> / StructParents 66 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 202 0 объект > поток xYYo8 ~ 7GX3D @ `gbdQ / Pc; 7M ܕ3 (39% ‘7.c

% $ SH> #OO ٔ’ؙ id} n4 & ra-V5’9eAG8QSML # 1 * X 2_ ~ I $ O # ռ x- * I8h

6 шагов для настройки временных мышей для беременных

Исследования эмбрионального или перинатального развития мышей обычно требуют оценки мышей на определенных стадиях развития. Оценка большого количества совпадающих по возрасту эмбрионов или новорожденных, вероятно, потребует настройки спаривания по времени. Ниже приведены шесть шагов для оптимизации вашего успеха:

1) Домашние самцы-производители индивидуально за 1-2 недели до спаривания.

Скорость восстановления количества сперматозоидов после спаривания у инбредных самцов различается. Хотя количество сперматозоидов обычно быстро восстанавливается (в течение ~ 2 дней) у многих штаммов, восстановление у других штаммов, таких как C57BL / 6, может занять до 4 дней. Изоляция самцов-производителей как минимум на 1 неделю после предыдущего спаривания максимизирует их фертильность и увеличит шансы на успешную беременность. * По понятным причинам, по возможности используйте опытных, проверенных кобелей. В противном случае лучше отдавать предпочтение старшим самцам (3-4 месяца), а не молодым.

2) Используйте самок в возрасте 8-15 недель.

Самки мышей обычно становятся половозрелыми к 6-8 неделям, хотя самки некоторых линий, особенно беспородных, могут достигать половой зрелости уже к 4 неделям. Таким образом, использование самок возрастом не менее 8 недель увеличивает вероятность того, что они забеременеют. Избегайте использования девственных самок старше 15 недель, потому что они часто менее надежно спариваются.

3) Самок объединяют в дом и синхронизируют их эстральные циклы перед спариванием.

Эстральный цикл у самок мышей обычно длится 4-5 дней и делится на четыре фазы: проэструс, эструс, метэструс и диэструс. Самки могут забеременеть только при овуляции (во время течки). Эструс длится всего около 15 часов, а овуляция обычно происходит в середине темного цикла.

Если вам нужно организовать большое количество вязок, более предсказуемый успех может быть достигнут путем группового содержания самок (4-10 на клетку, в зависимости от размера клетки) в течение 10-14 дней.Из-за явления, известного как эффект Ли-Бута, названного в честь его первооткрывателей С. Ван дер Ли и Л. М. Бута, у самок, проживающих в группах, как правило, более продолжительные и нерегулярные эстральные циклы с длительной фазой диэструса.

Последующее воздействие на этих самок феромона, выделяемого с мочой самцов, путем введения загрязненных постельных принадлежностей из клетки самцов в клетки самок приведет к синхронизированным половым циклам у самок, так что примерно 50% будут в эструсе и восприимчивы к спариванию на третьем этапе. ночь после воздействия.Это явление, известное как эффект Уиттена, обычно приводит к большему количеству беременных женщин, что упрощает создание большой когорты эмбрионов соответствующего возраста.

4) Проверьте эстральное состояние самок перед спариванием.

Чтобы еще больше повысить вероятность успешной беременности, выбирайте для спаривания только самок, находящихся в проэструсе или течке. Имея небольшой опыт, вы можете определить эстральное состояние женщины путем визуального осмотра ее наружных половых органов.В общем, если во второй половине дня влагалище опухшее, розовое и влажное, то самка, вероятно, будет восприимчива к спариванию в эту ночь. При необходимости эстральное состояние женщины может быть подтверждено морфологией клеток с помощью мазка из влагалища. Для получения более подробной информации об обоих методах см. Byers S et al. 2012 .

5) Добавьте только 1-2 самок в клетку каждого стержня.

Поскольку суточная способность самцов производить сперму ограничена, спаривайте не более 2 самок на одного самца-производителя.

6) На следующее утро рано утром проверьте наличие пробок во влагалище.

У самок, спарившихся ночью, на следующее утро будет вязкая вагинальная пробка. Пробка состоит из компонентов мужского эякулята, полученного из коагулирующих и везикулярных желез мужчины. Пробки заполняют влагалище самки и обычно сохраняются в течение 8-24 часов после спаривания.

Пробки некоторых штаммов, в частности C57BL / 6, могут быть тонкими и быстро растворяться. Пробки, которые обычно сохраняются дольше, также могут выпасть до растворения.Поэтому лучше проверять наличие пробок как можно раньше утром.

Вы должны знать, что вагинальная пробка не гарантирует, что женщина беременна. Это только указывает на то, что совокупление имело место. Самцы из некоторых пятен — в частности, BALB / cJ — будут спариваться с самками, даже если у них нет течки и они не восприимчивы к спариванию. Оценивая состояние охоты у самок и спариваясь только с теми, у которых овуляция, вероятно, будет происходить в течение ночи, вы можете увеличить частоту наступления беременности до 80-90%.

Когда нулевой день беременности? В JAX мы называем утро обнаружением пробки нулевым днём беременности (также называемое дней после совокупления (dpc 0)), хотя на самом деле это dpc 0,5.